細胞截留系統(tǒng)是一種生物學中常用的技術(shù)手段,可同時分離出單個或多個細胞子群,被廣泛應用于所涉及領(lǐng)域的研究和創(chuàng)新中。具體而言,在血細胞中它可以采集白血細胞(WBC)、淋巴細胞、單核細胞等,診斷各種血液疾??;在腫瘤領(lǐng)域中,它可以從體液或腫瘤質(zhì)取樣提供分子水平分析的標本。屬于分子分離技術(shù)中的濾膜分離技術(shù)。其基本原理是使用高分子多孔膜材料作為過濾介質(zhì),通過設定合適的操作參數(shù),篩選出不同尺寸,不同種類的細胞信號并通過更加高效的方式進行分離直接開展進一步分子分析。
細胞截留系統(tǒng)的運作原理:
1.將有機樣品(如人外周血)稀釋到合適濃度,并添加生理鹽水稀釋到控制的比例,保證細胞營養(yǎng)和適應環(huán)境后進行處理;
2.通常,細胞懸浮液首先在“沉降板”上富集一段時間。然后,血樣進入濾膜組件,其中的多孔濾膜只允許低分子量的溶質(zhì)、電介質(zhì)等通過,而阻擋大分子細胞還有纖維蛋白原等成份,從而實現(xiàn)混雜物的除去。
3.經(jīng)過前兩個步驟,截留細胞就位于濾膜的截留面,與濾膜表面接觸并成薄層狀排布。這時可以利用設備*的結(jié)構(gòu)和操作方法,關(guān)閉濾膜與收集盤之間的通道,在將負責截留的THB-10柱中的rosette清單給沿著抓手式印花扭出器或人力管直推壓入,約四五分鐘即可從THB-10柱的下部容量查看單克隆斑,并驗證其單克隆性。
4.目標是從樣品中純化出感興趣的單個細胞亞群,獲得高純度,不能解決單個細胞分離問題的時候,利用光學顯微這種物聯(lián)網(wǎng)設備以及高精度夾具結(jié)構(gòu)分類、定位和提取細胞。
細胞截留系統(tǒng)廣泛應用于分離和分析不同細胞類型的分子、蛋白質(zhì)或小分子化合物,或者尋找某些特定分子與疾病之間的關(guān)聯(lián)。對于藥物篩選和開發(fā)而言,細胞截留系統(tǒng)是至關(guān)重要的工具。通過布置不同孔徑大小的過濾器,可分離出分子量較小的化合物,甚至納米級別的微粒子。微粒分離和富集也是生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵步驟,可用于篩選生產(chǎn)所需的菌株并控制其數(shù)量。